一、原理
肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體?;颊叩难鍢悠贩謩e加入兩個測試孔內,當樣品沿膜擴散時,分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物,5分鐘后觀察結果。質控孔為質量控制,固定有人lgM,測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結果為藍色,陰性結果為無色。
二、材料
1、患者血清。
2、肺炎支原體lgM檢測試劑盒,包括:
(1)檢測卡:單獨錫紙包裝,卡上固定有肺炎支原體抗原或人lgM(質控孔)。
(2)陽性質控液(1.7ml):含有人抗肺炎支原體lgM的0.1%疊氮鈉緩沖液。
(3)陰性質控液(1.7ml):0.1%疊氮鈉緩沖液。
(4)酶結合物:(11ml):含有以堿性磷酸酶標記的抗人lgM單克隆抗體的0.1%疊氮鈉緩沖液。
(5)洗液:9.5%(W/V)的呱基氫氯酸。
(6)底物(15ml):含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%疊氮鈉的緩沖液。
(7)移液管。
三、樣本處理
血清樣品2—8℃可保存3天,如果不能在此期間測試,-20℃保存,樣品不宜反復凍融。
四、操作
1、從冰箱中取出試劑盒,置室溫平衡20分鐘。
2、從錫紙袋中取出檢測卡,作好標記。
3、用移液管滴加2滴血清到卡下端兩個測試孔中。
4、22—25℃下孵育2分鐘。2分鐘內血清應沿膜擴散至上端的測試孔中。
5、加入3滴酶結合物到下端兩個測試孔中,22—25℃下孵育2分鐘,酶結合物應沿膜擴散至上端的測試孔中。
6、加入3滴洗液到上端兩個測試孔中,等待完全吸收。
7、滴加2滴底物試劑到上端兩個測試孔,22—25℃下孵育5分鐘,5分鐘后立即觀察反應結果。
五、結果
根據(jù)上端兩個反應孔的反應結果判斷:
陽性結果:上端兩孔都出現(xiàn)藍色。提示肺炎支原體性lgM存在。
陰性結果:質控孔出現(xiàn)藍色或輕微藍色,測試孔無色或呈暗灰色,提示不存在肺炎支原體lgM或其濃度在檢測下限之下。
無效反應:質控孔不出現(xiàn)藍色。產(chǎn)生無效反應的可能原因為:試劑或檢測卡質量問題,操作不當,樣品擴散不好,酶結合物嚴重污染,血清中含有過多脂質成分等。無污染血清可離心后再次測試 。
六、特異性
該試劑盒與下列因素不發(fā)生交叉反應:腺病毒、風濕因子、呼吸道合胞病毒、抗核抗體、流感病毒A型和B型、副流感病毒3型、組織胞漿菌、巨細胞病毒等。
**格蘭陰性雙球菌:鏡檢可見在一個平面上分裂成雙排列 **霉菌(白色念珠菌...[詳細]