來自復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)的研究人員證實(shí)，**N3激活突變促進(jìn)了膽管細(xì)胞癌癌細(xì)胞增殖和遷移，且與患者的腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)聯(lián)。這一研究發(fā)現(xiàn)發(fā)表在近期的發(fā)表在國際胃腸病學(xué)雜志（Gastroenterology，IF 11.675）上。

    來自復(fù)旦大學(xué)的樊嘉（Jia Fan）教授、何祥火（Xiang–Huo He）和周儉（Jian Zhou）教授是這篇論文的共同通訊作者。樊嘉教授擅長肝臟腫瘤外科診療及肝臟移植。何祥火教授的主要研究領(lǐng)域?yàn)橄祼盒阅[瘤發(fā)生于轉(zhuǎn)移分子機(jī)理研究。周儉教授主要研究方向?yàn)楦伟└吻谐蚋我浦残g(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的防止。

    肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌（intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC）是指位于左右肝管匯合部（二級分支）以上的膽管上皮細(xì)胞起源的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率趨向增高。由于臨床表現(xiàn)缺乏特異性，早期確診困難，誤診率高，發(fā)現(xiàn)時(shí)多數(shù)已進(jìn)入晚期，很難通過手術(shù)方法切除。且這類癌癥對于目前臨床應(yīng)用藥物敏感性欠佳，預(yù)后較差。深入了解肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌發(fā)生及轉(zhuǎn)移機(jī)制對于開發(fā)更有效的治療策略，改善疾病結(jié)局具有重要的意義。

    外顯子組測序 （Exome sequencing）是近年發(fā)展起來的一種利用序列捕獲技術(shù)將全基因組外顯子區(qū)域DNA捕捉并富集后進(jìn)行高通量測序的基因組分析方法。由于外顯子組測序只需針對外顯子區(qū)域的DNA即可（目前由DNA變異引起的疾病估計(jì)有85%以上來自于外顯子組區(qū)域的變異），因此遠(yuǎn)比進(jìn)行全基因組序列測序更簡便、經(jīng)濟(jì)、高效，其目標(biāo)區(qū)域覆蓋度也更高，便于變異檢測。

    目前，外顯子組測序已經(jīng)在米勒綜合癥、歌舞伎綜合癥、重型顱腦畸形等孟德爾疾病的研究中得到成功應(yīng)用。還有其它一些癌癥和復(fù)雜性疾病也應(yīng)用外顯子組測序觀察到高度相關(guān)的突變。

    在這篇文章中，研究人員利用這一測序技術(shù)對7對ICC腫瘤和周圍非腫瘤組織篩查了體細(xì)胞變異?；谕怙@子組測序，他們鑒別出了ICC樣本中最頻繁改變的一些信號通路，證實(shí)其調(diào)控了蛋白質(zhì)磷酸化，并確定了最頻繁突變的基因是蛋白酪氨酸磷酸酶（**s）編碼基因。他們在其中4個(gè)ICC外顯子組中鑒別出9個(gè)編碼**s的基因發(fā)生了突變。隨后，他們又在124對ICC和非腫瘤樣本中篩查了這些突變。研究顯示51.6%的ICCs至少有1個(gè)**基因發(fā)生了體細(xì)胞突變；41.1%的有**N3突變。他們發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞系中轉(zhuǎn)基因表達(dá)**N3基因可促進(jìn)細(xì)胞增殖、克隆形成和遷移。

    研究人員證實(shí)，在ICC樣本中頻繁檢測到的**N3L232R和**N3L384H是一些功能獲得性突變；它們在細(xì)胞系中表達(dá)進(jìn)一步促進(jìn)了細(xì)胞增殖、克隆形成和遷移。ICC相關(guān)的一些**N3變異體改變了磷酸酶活性。具有**N3激活突變或高水平**N3蛋白的腫瘤患者相比于沒有這些特征的患者具有更高的疾病復(fù)發(fā)率。

    通過對來自患者的ICC樣本進(jìn)行全外顯子組測序，研究人員證實(shí)測試的40%腫瘤樣本包含**N3體細(xì)胞突變。并證實(shí)了**N3激活突變及高水平表達(dá)與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)。從而為膽管細(xì)胞癌指出了一個(gè)潛在的預(yù)后標(biāo)記物及治療靶點(diǎn)。