臨床相關(guān)的研究已發(fā)現(xiàn)腫瘤大小、數(shù)目、血管侵犯、播散灶等是肝癌重要的預(yù)后相關(guān)因素，但肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是影響遠期生存的重要因素，臨床根治性手術(shù)切除或肝臟移植術(shù)后超過70%的肝癌病人可以發(fā)生腫瘤復(fù)發(fā)或遠處轉(zhuǎn)移，高達90%以上的死亡因素與腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有關(guān)。而臨床實踐提示我們，單純肝癌大小、數(shù)目等常見的臨床病理特征無法精確預(yù)測腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移潛能，腫瘤的生物學(xué)特征可能是復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中真正的關(guān)鍵因素。
 

    既往的研究獲得大量與肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)的分子標記物，但由于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性，單個分子標記物對肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移機制的詮釋及干預(yù)方面的價直有限。利用高通撤的芯片技術(shù)可以獲得大趕的分子信息，已發(fā)現(xiàn)了一些可以代表肝癌不同生物學(xué)行為的“分子標簽”，其中的一些關(guān)鍵基因、蛋白是后期研究的重點。近期，從微小RNA(microRNA)的研究來看，也發(fā)現(xiàn)有肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移特征性的miRNA的表達譜，這也進一步告訴我們：從基因的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后的調(diào)節(jié)及蛋白質(zhì)的表達等各個方面，都參與對肝癌生物學(xué)特征的調(diào)控。

一、上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化

    在肝癌轉(zhuǎn)移的起始階段，上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是腫瘤轉(zhuǎn)移“侵襲-轉(zhuǎn)移級聯(lián)反應(yīng)”完成的基礎(chǔ)。“侵襲-轉(zhuǎn)移級聯(lián)反應(yīng)(invasion-metaslasiscascade)”是指腫瘤轉(zhuǎn)移過程中腫瘤細胞通過局部浸潤、侵入血管、隨血液循環(huán)系統(tǒng)播散并在其中存活、移出血管、在新的部位定居并增殖等過程。

    目前對腫瘤轉(zhuǎn)移過程比較清楚的是，在腫瘤轉(zhuǎn)移啟動時腫瘤細胞間必須先失黏附從原發(fā)灶脫離，然后借助與細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,ECM)間連續(xù)的黏附、接觸和黏附解除中獲得移動的牽引力。然后，腫瘤細胞通過分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmelalloproteinases,MMPs)等降解、突破ECM和基底細胞層的屏障。進入血管后在血液循環(huán)中隨血流移動，克服血流剪切力的影響和逃避天然免疫的攻擊而存活，在遠處的靶器官和組織中被捕獲，移出血管、生存形成微轉(zhuǎn)移灶，最后重新啟動增殖程序形成臨床可以檢測到的轉(zhuǎn)移灶。在此過程中，腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化是完成轉(zhuǎn)移過程的基礎(chǔ)及首要關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

    EMT指上皮細胞轉(zhuǎn)化為具有成纖維細胞或間質(zhì)表型細胞的生物學(xué)過程。通過EMT，上皮細胞失去了細胞極性、與基底膜的黏附等上皮表型，獲得了較高的遷移與侵襲、抗凋亡和降解細胞外基質(zhì)的能力等間質(zhì)表型，這是腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。當細胞發(fā)生EMT時，會產(chǎn)生癌細胞生物學(xué)特性的改變和核異位現(xiàn)象，如上皮表型標志物E-鈣黏蛋白等逐漸喪失，而波形蛋白、N-鈣粘蛋白等間葉樣組織表型特征分子的表達上調(diào)，β-連環(huán)蛋白則發(fā)生從細胞膜轉(zhuǎn)位到細胞核的改變。EMT是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學(xué)過程，腫瘤微環(huán)境中各種刺激可經(jīng)多種信號途徑誘導(dǎo)這一過程，且各級信號通路蛋白形成非常復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，導(dǎo)致EMT的持續(xù)進行。如成纖維細胞來源的生長因子，包括肝細胞生長因子(hepatocytegrowthfactor，HGF)、表皮生長因子(epidermalgrowthfactor，EGF)、成纖維細胞生長因子(fibroblastgrowthfactors，F(xiàn)GF)等，通過與其受體結(jié)合，激活受體酪氨酸激酶，誘導(dǎo)EMT發(fā)生。

    我們的研究發(fā)現(xiàn)已CD151為核心的四跨膜網(wǎng)絡(luò)是調(diào)節(jié)EMT的關(guān)鍵信號通路，CD151是一種四跨膜蛋白，它與不同家族成員互相聚集，并與細胞表面跨膜蛋白如生長因子受體、整合索等形成功能復(fù)合物，即四跨膜網(wǎng)絡(luò)。此網(wǎng)絡(luò)內(nèi)某一四跨膜蛋白表達改變對網(wǎng)絡(luò)內(nèi)生長因子受體與整合索功能會產(chǎn)生重要影響，如在乳腺癌細胞中過表達CD151可上調(diào)整合素信號；而升高四跨膜蛋白CD82卻抑制整合素與生長因子受體信號。在肝癌細胞中過表達CD151，可上調(diào)整合素與肝細胞生長因子受體(c-Met)．誘導(dǎo)肝癌細胞EMT的發(fā)生。免疫共沉淀聯(lián)合質(zhì)譜分析還發(fā)現(xiàn)肝癌細胞中CD151可與多種整合索及生長因子受體形成復(fù)合物，促進肝癌轉(zhuǎn)移。

二、循環(huán)腫瘤細胞

    轉(zhuǎn)移是一個多步驟、多環(huán)節(jié)的復(fù)雜過程，而在這一過程中循環(huán)腫瘤細胞(circulatingtumorcell，CTC)的存在扮演重要角色。CTC定義為源自原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶的存在于外周循環(huán)中的腫瘤細胞，在正常人體內(nèi)幾乎不存在。國際上多項臨床研究已表明CTC檢測應(yīng)用于乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌等患者，不但能較傳統(tǒng)腫瘤標志物或影像學(xué)方法提前預(yù)警腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生，還能實現(xiàn)對抗腫瘤治療效果的實時監(jiān)測并且能提供較準確的患者預(yù)后信息。我們初步研究利用目前較成熟的CTC檢測技術(shù)-CellSearchTM系統(tǒng)（FDA認證）來檢測肝癌患者外周血中CTC，結(jié)果表明65.85%的患者術(shù)前外周血中存在CTCoCTC數(shù)量不僅與腫瘤臨床特征（血管侵犯、腫瘤分化及術(shù)前AFP水平等）密切相關(guān)，還是一個獨立的HCC術(shù)后復(fù)發(fā)預(yù)測指標。因此，CTC可能在肝癌的術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)中發(fā)揮著重要作用。

    越來越多的研究表明，腫瘤組織中存在著腫瘤干細胞(cancerstemcell，CSC)，它們具有自我更新、多向分化、無限增殖、高致瘤及耐藥等特性，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)中起關(guān)鍵作用。每天有數(shù)以千計的腫瘤細胞脫離原發(fā)瘤進入循環(huán)血中，但并不是每個CTC都能成為轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的“種子”。這除有環(huán)境（土壤）因素外，“種子”本身特性也決定著其能否在新環(huán)境中成功“殖民”。目前具有腫瘤干細胞特性的“肝癌干細胞樣細胞”已有許多成功分離的報道，而外周血中循環(huán)腫瘤干細胞(circulatingtumorstemcell，CTSC)，如循環(huán)肝癌干細胞(circulatinglivercancerstemcell，CLCSC)的存在也初步被征實，相對于較成熟的CTC而言，CLCSC具有更強的成瘤、耐藥能力，從而成為肝癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的關(guān)鍵。

三、肝癌微環(huán)境

    腫瘤微環(huán)境對肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的影響研究也日漸深入。就癌細胞而言，間質(zhì)可影響其從發(fā)生到轉(zhuǎn)移的全過程，對腫瘤起增強或抑制作用。就間質(zhì)而言，腫瘤可導(dǎo)致其理化性質(zhì)、成分、細胞因子構(gòu)成等發(fā)生改變，形成一個盡可能有利于、甚至促進腫瘤生長的腫瘤微環(huán)境。近年來，在肝癌研究中，已有多項研究表明非腫瘤細胞成分的癌周組織基因特征表達譜可以預(yù)測肝癌的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，提示肝癌生長的微環(huán)境對轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)潛能有重要影響。我們還發(fā)現(xiàn)肝癌組織中調(diào)節(jié)性T淋巴細胞、巨噬細胞等參與肝癌轉(zhuǎn)移，是與預(yù)后相關(guān)的重要微環(huán)境因素。這些均提示腫瘤微環(huán)境可能才是真正干預(yù)的靶點。腫瘤千細胞也是微環(huán)境理論的重要組成部分。腫瘤干細胞具有自我更新的能力，能抵抗凋亡及藥物所致的損傷，在一定的微環(huán)境條件下能重新生長。

    在臨床治療方面，由于肝細胞癌對傳統(tǒng)的化療，無論是單獨或聯(lián)合用藥，都非常耐受，因此必須發(fā)展新的治療模式。生物靶向治療與傳統(tǒng)化療的區(qū)別在于靶向藥物通過干擾調(diào)節(jié)腫瘤生長及侵襲信號通路中的關(guān)鍵分子來阻斷腫瘤細胞的生長及播散。靶向藥物索拉非尼(sorafenib)通過抑制腫瘤細胞增殖和血管生成，已是晚期肝癌標準化的療法之一。但已知肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是多步驟、多通路參與的復(fù)雜生物學(xué)行為，單靶點、單分子的干預(yù)研究可能無法有效阻止肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。多靶點干預(yù)，多種靶向藥物聯(lián)合，才可能有效預(yù)防肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。中醫(yī)中藥在肝癌預(yù)防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移方面也可能發(fā)揮重要作用。小復(fù)方“松友飲”已經(jīng)在動物及體外實驗被證明證實有調(diào)節(jié)免疫、抑制腫瘤血管生成等作用，可以干預(yù)肝癌的復(fù)發(fā)，但仍需有臨床試驗來證實其確切療效。